上海晶抗生物ELISA試劑盒的組成會(huì)根據(jù)檢測(cè)目標(biāo)物、試劑盒類型(如間接法、雙抗體夾心法、競爭法) 略有差異,但核心組分基本一致,以下是通用的完整組成清單,同時(shí)標(biāo)注各組分的功能和適用場景:

一、 核心檢測(cè)試劑
預(yù)包被板(Pre-coated Microplate)
即吸附了捕獲抗體(夾心法)、抗原(間接法)或封閉劑的 96 孔酶標(biāo)板,是 ELISA 反應(yīng)的載體。板條可拆分,方便按需使用。
標(biāo)準(zhǔn)品(Standard)
已知濃度的目標(biāo)分析物(如細(xì)胞因子、激素、抗原等),通常為凍干品或液體,需梯度稀釋后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,用于定量待測(cè)樣本。
檢測(cè)抗體 / 酶標(biāo)二抗
夾心法:提供生化檢測(cè)抗體,可與目標(biāo)物特異性結(jié)合;
間接法:提供酶標(biāo)記二抗(如 HRP 標(biāo)記羊抗人 IgG);
部分試劑盒會(huì)搭配酶結(jié)合物(酶標(biāo)記的抗原 / 抗體)。
底物溶液(Substrate Solution)
酶促反應(yīng)的顯色底物,常見組合為 TMB 底物液 A+B(辣根過氧化物酶 HRP 專用)或 PNPP 底物液(堿性磷酸酶 AP 專用),反應(yīng)后會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色(TMB)或黃色(PNPP)。
終止液(Stop Solution)
通常為酸性溶液(如 2M H?SO?),用于終止酶促顯色反應(yīng),使 TMB 底物的藍(lán)色轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定的黃色,便于酶標(biāo)儀讀數(shù)。
二、 輔助試劑(Sample Diluent)
用于稀釋待測(cè)樣本(血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等),維持樣本的穩(wěn)定性,減少基質(zhì)效應(yīng)干擾。
洗滌液(Wash Buffer)
通常為含 Tween-20 的磷酸鹽緩沖液(PBS-T),用于洗去孔內(nèi)未結(jié)合的游離物質(zhì),降低非特異性結(jié)合背景。一般為濃縮液,使用前需用蒸餾水稀釋。
封閉液(Blocking Buffer)
若試劑盒未提供預(yù)包被板,會(huì)配套封閉液(如 5% 脫脂奶粉、BSA 溶液),用于封閉酶標(biāo)板的空白位點(diǎn),減少非特異性吸附。
三、 耗材與文件
封板膜(Plate Sealer)
分為粘性封板膜和透氣封板膜,前者用于孵育時(shí)防止液體蒸發(fā)和交叉污染,后者用于洗滌步驟。
產(chǎn)品說明書(Instruction Manual)
包含詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟、試劑配制方法、結(jié)果計(jì)算方式、注意事項(xiàng)及質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),是實(shí)驗(yàn)操作的核心指導(dǎo)文件。
補(bǔ)充說明
不同物種的 ELISA 試劑盒(如豬、牛、人源),核心組成一致,差異僅在于抗體 / 抗原的物種特異性。
定量 ELISA 試劑盒會(huì)配套完整的標(biāo)準(zhǔn)品梯度,定性試劑盒可能簡化標(biāo)準(zhǔn)品配置。
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